2001 Caribbean Division Meeting Abstracts
June 11-15, 2001 - La Habana, Cuba

Posted online August 8, 2001

De la hibridación in situ en el estudio de cultivares de caña de azúcar resistentes y susceptibles a enfermedades. RICARDO ACEVEDO (1), Angeles Cuadrado (2), Susana Moreno Díaz de la Espina (3), y Consuelo de la Torre (3). (1) Instituto Nacional de Investigaciones de la Caña de Azúcar, MINAZ, Ave. VanTroi 17203, CP 19210, Boyeros, Ciudad de La Habana, Cuba; (2) Universidad de Alcalá de Henares, Madrid, España; (3) Centro de Investigaciones Biológicas del CSIC, Velázquez # 144, 28006 Madrid, España. Publication no. P-2002-0001-CRA.

La hibridación in situ con fluorescencia (FISH) es una herramienta poderosa y sensible para detectar y localizar las secuencias de ácidos nucleicos, brindando información espacial y muy específica sobre los mismos. El objetivo de este trabajo es la aplicación de esta técnica en el estudio de tres cultivares de caña de azúcar: B42231 (susceptible al carbón) C236-51 (susceptible al VMCA) y My5514 (resistente a las dos enfermedades), para caracterizar sus genomas y así conocer el material genético con que se cuenta para su posible utilización en la obtención de variedades resistentes a enfermedades. Se logró detectar simultáneamente dos tipos de familias multigénicas (18S-5,8S-25S y 5S) cada una en lugares diferentes de hibridación. Para My5514 y B42231 fueron 10 sitios de hibridación y en C236-51 fueron 12. Con la localización de los genes ribosomales se pudo estimar los cromosomas de origen materno (S. officinarum) y paterno (S. spontaneum) y así determinar la constitución genómica de cada cultivar, detectando la presencia de 4, 14 y 8 cromosomas extras en My5514, B42231 y C236-51, respectivamente, al mismo tiempo se apreció un incremento de 0,8 y 0,7 pg de ADN en B42231 y C236-51, existiendo introgresión por translocación de porciones de S. spontaneum dentro de cromosomas de S. officinarum. Todo esto provoca la aneuploidía en estros individuos. El empleo de esta técnica facilita la caracterización de los diferentes cultivares para su mejor aprovechamiento en la búsqueda de la resistencia a enfermedades.

Virulence and cultural characteristics of Colletotrichum sp. isolates collected from pigeonpea pods in Puerto Rico. Myrna Alameda, R. ECHÁVEZ-BADEL, and A. Sotomayor-Ríos. Departments of Agronomy and Soils and Crop Protection, University of Puerto Rico, Mayagüez Campus, Mayagüez, Puerto Rico 00680-9030. Publication no. P-2002-0002-CRA.

The pod anthracnose (PA) caused by the fungus Colletotrichum sp.was recently observed in the pigeonpea-producing area of Puerto Rico (PR). In order to characterize and determine the virulence of the fungus isolates, infected pods were collected in the Jobos area and at the Agricultural Experiment Substation (AES) of the Isabela municipality on the northwest coast of PR. Differences in virulence and cultural characteristics were determined between the Jobos and the AES isolates under laboratory conditions. The Jobos isolate was more virulent than that of the AES. In this study in vitro inoculation technique and screening protocol for PA-resistant pigeonpea germplasm will also be reported.

Increase insect resistance in transgenic rice stably expressing trypsin inhibitor BTI-CMe. J. ALFONSO-RUBÍ (1), F. Ortego (2), P. Castañera (2), P. Carbonero (3), and I. Díaz (3). (1) Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología de Sancti Spiritus. Apdo Postal 83, CP 6020, Sancti Spiritus, Cuba; (2) Dpto de Biología de Plantas,Centro de Investigaciones Biológicas, CSIC, Velazquez 144, 28006 Madrid, Spain; (3) Laboratorio de Bioquímica y Biología Molecular, Dpto de Biotecnología-UPM, E.T.S Ingenieros Agrónomos, Ciudad Universitaria s/n, 28040 Madrid, Spain. Publication no. P-2002-0003-CRA.

Alternativas para el control químico de Erysiphe cichoracearun D.C. agente causal del mildiu polvoriento en el cultivo de la calabaza (Cucurbita moschata) Duch. Julia Almándoz (1), Luis Pérez (1), Felipe Rodríguez (1), y Rafael Hernández (1). (1) Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110. No. 514 esq. 5taB. Playa. Ciudad de la Habana, Cuba. Email: inisav@ceniai.inf.cu. Publication no. P-2002-0004-CRA.

La efectividad de diferentes familias de fungicidas con distintos mecanismos de acción fué evaluada sobre E. cichoraearum D.C.en el cultivo de la calabaza. Para ello se realizaron cuatro ensayos de campo y uno en condiciones de producción. La mayor inhibición del desarrollo micelial correspondió a los fungicidas sistémicos, tebuconazol (triazol) y azoxystrobin (estrobilurinas) a dosis de 0,250 kg i.a/ha cada 10 días, los que fueron similares en cuanto a efectividad al estandar comercial benomyl a la dosis de 0,200 kg i.a/ha.El ataque foliar fué de 33%, 38% y 40% respectivamente. Dinocap a 1,2 kg i.a/ha, folpet a la dosis de 3 kg i.a/ha y azufre a la dosis de 4,2 kg i.a/ha aplicados cada 7 días, mostraron efectos sobre el mildiu polvoriento como fungicidas de contacto, con efectividades de 82,71 y 63% respectivamente. La efectividad de éstos fue inferior a los fungicidas sistémicos. La dosis DL(50) y DL(95) para aislados sensibles de E. cichoracearum al benomyl, tebuconazol y azoxystrobin son de 0,322- 7,13 mg i.a/l. Desde el punto de vista de factibilidad técnica- económica las mejores estrategias se obtuvieron con folpet + azoxystrobin, folpet + tebuconazol y folpet + benomyl; con ganancias de 686,46; 652,19 y 450,60 pesos/ha respectivamente. No se detectaron niveles de residuos después de los 7 días de aplicados, para los tratamientos sistémicos utilizados en los ensayos, lo que permite cosechar sin riesgo en este intervalo.

Primer informe de la presencia de virosis en cultivares de fresa (Fragaria ananassa Duch) en Cuba. M. Alonso, J. R. Cueto, J. M. Pérez, J. Rodríguez, K. Velázquez, L. Batista, M. R. Hernández, and D. González. Instituto de Investigaciones de Cítricos y otros Frutales. Publication no. P-2002-0005-CRA.

La mayoría de las infecciones virales en la fresa pueden encontrarse latentes en las variedades comerciales. En áreas de reproducción de cultivares de fresa establecidos en Alquízar, así como en plantaciones de Artemisa, provincia de La Habana, se muestrearon hojas de plantas asintomáticas y otras que mostraban ligero enanismo, deformación y mosaico foliar. Mediante la técnica inmunoenzimática ELISA se logró detectar las virosis: strawberry mild yellow edge virus (SMYEaV) y strawberry latent ringspot virus (SLRV) en cultivares de fresa. Las variedades afectadas por ambas virosis fueron: Oso Grande, Parker, Chandler, Missionaria y Rabunda. El SLRV se encontró con mayor frecuencia en los cultivares analizados que el SMYEaV. Se comprobó por microscopía electrónica, la presencia de partículas virales filamentosas de dimensiones: 171-180 nm de largo y 11-12 nm de ancho; y partículas esféricas de 26-30 nm de diámetro. Estas características se corresponden con los virus SMYEaV y SLRV, detectados por ELISA en los cultivares de fresa.

Identificación de especies de fusarium link en plantas y semillas de diferentes cultivos. LUIS M. BARRIOS, Hilda Neninger, and Elsa I. Hidalgo. Laboratorio Central de Cuarentena Vegetal. Ayuntamiento #231, (^e)/ San Pedro y Lombillo, Plaza de la Revolución, Ciudad de La Habana, Cuba. E-mail: cnsv@ceniai.inf.cu. Publication no. P-2002-0007-CRA.

Durante los años 1999 y 2000 fueron recepcionadas en el Laboratorio Central de Cuarentena Vegetal muestras de semillas de Adansonia, Allium, Apium, Asparragus, Beta, Capsicum, Carun, Citrilus, Coriandrum, Cucumis, Daucus, Gossypium, Hibiscus, Lactuca, Lycopersicum, Oryza, Pastos, Phaseolus, Spinacea, Zea, Brassica, Amaranthus, Vigna, Solanum, Shilanthus, California y Xanthosoma; pseudotallos de Musa spp, tallos de Heliconia spp y Saccharum officinarum, tubérculos de Solanum tuberosum y raíces de Nicotiana tabacum procedentes de diferentes países y de Cuba, con el objetivo de determinar la presencia de hongos patógenos en las mismas. En este trabajo se notifican por hospedantes 16 especies pertenecientes al género Fusarium sp identificadas mediante cámaras húmedas, siembras en medios de cultivos y uso de claves taxonómicas. F. anthophilum (A. Braum) Wollenw, F. avenaceum (Fr.) Sacc, F. culmorum (W. G. Smith) Sacc., F. chlamydosporum Wollenw., F. dimerum Penzig., F. pallidoroseum (Cke.) Saac., F. equiseti (Corda) Sacc. sensu Gordon, F. graminearum Schawabe., F. heterosporum Nees., F. moniliforme Scheldon., F. oxysporum Schlecht. emend. Snyd. &Hans, F. proliferatum (Matsushima) Nirenberg., F. solani (Mart.) Appel & Wollenm. emend. Snyd. &Hans, F. sporotrichioides Sherb, F. subglutinans Wollenw & Reink., y F. trichothecioides Wollenw, fueron las especies identificadas. También son relacionadas cada una de las especies con su procedencia y parte de la planta afectada.

Biología poblacional de Fusarium oxysporum f. sp. cubense de bananos y plátanos en Cuba: grupos de compatibilidad vegetativa. Alicia Batlle-Viera y Luis Pérez-Vicente. Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Ministerio de Agricultura de Cuba. 110 e/ 5ta B y 5ta F., Gaveta 634, 11300, Playa, Ciudad Habana, Cuba. E mail: lperez@inisav.cu; perezl_1999@yahoo.com. Publication no. P-2002-0008-CRA.

El Mal de Panamá causado por Fusarium oxysporum f. sp. cubense (Foc) fue el causante de la desaparición del cultivo comercial de los clones Manzano y Gros Michel en Cuba y en diferentes países de América. Más recientemente han sido observados clones FHIA resistentes a Sigatoka negra, afectados por Foc. Han sido identificadas internacionalmente cuatro razas del patógeno. Para estudiar la variabilidad del Foc en Cuba, se realizaron 36 aislamientos monospóricos del hongo, obtenidos a partir de clones naturalmente infectados de 26 localidades de 8 provincias de Cuba, los que fueron mantenidos en papel de filtro y almacenados a 4 ºC. Mediante cromatografía gaseosa y espectrofotometría de masa se caracterizaron los compuestos volátiles producidos por los aislados sembrados en un medio a base de arroz. Se generaron mutantes nit auxotróficos en medio mínimo rico en clorato de potasio y se identificaron posteriormente los fenotipos nit a que pertenecían y se probó la autocompatibilidad, eliminándose los autoincompatibles (fenotipos crn). Finalmente, se sometieron a pruebas de compatibilidad, los nit 1 obtenidos de cada aislado, contra una colección internacional de nit M pertenecientes a todos los GCV de Foc. En medio K(2) no se observó colonias lacinadas en ninguno de los aislados. Se determinó la producción de compuestos volátiles con una alta similitud con el etenyl-benceno y el biciclo 4.2.0-Octa-1.3.5-trieno. Se determinó que las poblaciones de Foc de Cuba estudiadas hasta el presente, pertenecen de los GCV 01210 y 0124/0125.

Estudio de las especies de hongos endofíticos asociados a la necrosis de las raíces de bananos en plantaciones de bananos y plátanos de Cuba. ALICIA BATLLE-VIERA y Luis Pérez-Vicente. Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Ministerio de Agricultura de Cuba. Ciudad Habana, Cuba. E mail: lperez@inisav.cu. Publication no. P-2002-0009-CRA.

Studies on induced resistance (IR) effect of the plant extract from Hedera helix against fire blight. Ö. Baysal, P. Laux, and W. ZELLER. Federal Biological Research Centre for Agriculture and Forestry (BBA), Institute for Biological Control, Heinrichstr. 243, 64287 Darmstadt, Germany. Publication no. P-2002-0010-CRA.

The plant extract of Hedera helix was assayed on its induced resistance (IR) effect against fire blight on the highly susceptible apple rootstock M26. The experiment was carried out under controlled climatic conditions in the greenhouse. Moreover as marker of resistance, in physiological studies total phenol content, enzyme activities of peroxidase (PO), polyphenoloxidase (PPO) were estimated. Pre-inoculation application of the plant extract to the foliage of M26 rootstocks by an induction interval of 2 days reduced the severity of the disease as well as the growth of bacteria in the tissue. Reduction of disease severity up to 31% was correlated with a decreasing effect on the growth of bacteria up to 43% during the course of infection. In the physiological studies significant changes in the phenol metabolism as an indication of a resistance reaction could be observed; a marked increase of the total phenol content in connection with higher activities in peroxidase (PO) and polyphenoloxidase (PPO) was found after plant extract treatment in inoculated and uninoculated shoots particularly, between 2 days and 4 days after application. Summarising these effects, an induced resistance effect of the plant extract could be determined against fire blight.

Begomovirus coat protein and whitefly mt Cytochrome Oxidase I gene trees are concordant - accurate predictors of the origin of viral species and vector genotypes. J. K. BROWN. Department of Plant Sciences, University of Arizona, Tucson, AZ 85721 USA. Publication no. P-2002-0011-CRA.

Phylogenetic analyses were undertaken for begomoviruses (Family: Geminiviridae) and their whitefly vector, Bemisia tabaci (Genn.) from different hosts and geographic locales, worldwide. Begomoviral CP sequence analysis predicts separation of begomoviruses into Old and New World groups, respectively. Old World viruses are separated into distinct clades with a geographical basis. New World begomoviruses form a single large polytomy also containing several distinct lineages. However, geographical boundaries are less apparent and species are somewhat less divergent within the New World group compared to Old World species. However, worldwide, begomoviruses appear to have evolved from a minimal number of founder events followed by isolation. Conversely, it is possible that multiple founder events occurred in each region, but that only a few lineages survived. Comparison of viral CP with whitefly mt COI trees indicate they are generally concordant, and predict similar phylogeographic distributions of lineages and degrees of nt divergence between and within Old and New World groups. New World B. tabaci form one large polytomy comprising two minimally divergent (<2-4%) geographical subgroups. In contrast, five to six Old World clades that diverge by approximately 8-12% from on another and from the New World group are well supported. Consequently, begomoviral CP and whitefly mt COI trees are reliable for predicting the origin of extant lineages.

Diversity of begomoviruses from vegetables, cotton, and weeds in Guatemala and Honduras by viral coat protein sequence analysis. J. K. BROWN (1), M. Palmieri (2), M. M. Doyle (3), A. M. Idris (1), and R. D. Martyn (4). (1) Dept. Of Plant Sciences, The University of Arizona, Tucson, AZ USA; (2) University of Del Valle, Guatemala; (3) ZAMORANO, Honduras; and (4) Department of Botany & Plant Pathology, Purdue Univ., West Lafayette, IN USA. Publication no. P-2002-0012-CRA.

The diversity and distribution of Begomoviruses (Family: Geminiviridae) from bean, melon, pepper, tomato, watermelon and weeds adjacent to crops were investigated by comparative analysis of viral coat protein (CP) sequences. Nucleic acids were isolated from symptomatic leaves. Extracts were assessed for begomovirus presence by polymerase chain reaction (PCR) using degenerate primers that yield a 576 bp fragment of the CP. Positive samples were further subjected to PCR using primers that direct the amplification of a fragment containing the CP ORF and a portion of the non-coding, 'common region' (CR). Amplicons (approximately 1.1 kbp) were cloned and the nucleotide (nt) sequence determined. Comparison of viral CP sequences of with well-studied begomoviruses revealed the presence of Bean golden mosaic virus (BGMV) in bean, a cotton leaf crumple-like virus (CLCV) in cotton, Havana tomato virus (HTV) in tomato and weeds, a squash leaf curl-like virus, Texas pepper virus (TPV) in pepper and tomato, and a relative (93% nt identity) of Tomato mottle virus (ToMoV). In addition, several previously undescribed begomoviruses were detected in crops and weeds, indicating that bipartite begomoviruses in Central America are more diverse and widespread than previously reported.

The whitefly genome project: DNA microarrays to discover genes important in the biology of the whitefly Bemisia tabaci. J. K. Brown (1), S. Morin (1), Z. Zhang (1), M. Ghanim (2), and H. Czosnek (2). (1) Department of Plant Sciences, University of Arizona, Tucson, AZ, USA; (2) Department of Field Crops and Genetics, Faculty of Agriculture, Hebrew University of Jerusalem, Rehovot, Israel. Publication no. P-2002-0013-CRA.

The nuclear genome size of Bemisia tabaci was estimated by flow cytometry. The nuclear DNA content of male (1N) and female (2N) whiteflies was 1.04 and 2.06 pg, whereas, the DNA content of Drosophila was 2C = 0.80 pg, indicating an estimated genome size for B. tabaci of approximately 2.5 times larger than Drosophila (13,600 genes). Directional cDNA libraries were prepared from B. tabaci and Trialeurodes vaporariorum. NotI-SalI digested cDNAs of a mean size of approximately 800 bp were cloned into pSPORT1 and cDNA clones were amplified by PCR. Approximately 2,500 ESTs from B. tabaci and 2,500 ESTs from T. vaporariorum were printed and gene expression was compared by hybridizing with cRNAs from T. vaporariorum labeled with Cy3 and of cRNAs from B. tabaci labeled with Cy5. cRNAs from T. vaporariorum hybridized mainly with ESTs from T. vaporariorum, and cRNAs from B. tabaci hybridized mainly with ESTs from B. tabaci indicating different patterns of gene expression. Genes from maize and the actin gene from B. tabaci were used as negative and positive controls, respectively. Whitefly chips will be used to address whitefly gene expression in relation to virus transmission, host adaptation, and other global biological questions.

Characterization of Xanthomonas axonopodis strains causing citrus canker in Argentina. B. I. CANTEROS (1) and M. Naranjo (2). (1) INTA EEA Bella Vista 3432 Ctes., Argentina; (2) IICIT, Havana, Cuba. Publication no. P-2002-0014-CRA.

Strains of X. axonopodis has been isolated from canker lesions on citrus plants in NE Argentina in the last ten years. Strains of A type became prevalent since its introduction and is the only type isolated in nature, type B strains were isolated from few lemon groves until 1993, after that time the strains disappeared from the field and replaced by the most aggressive A type. The B strains were identified by the lack of growth in nutrient agar, negative for milk proteolysis, and lack of survival in 2 per cent NaCl. The A strains were positive in all those tests. One C type from Brazil was used for comparison. The B strains were consistently less aggressive than the A strains in all citrus types (lemon, lime, orange, grapefruit, and tangerines). The C type caused typical lesions only on Key lime (KL) and few small lesions in sour orange. KL was highly susceptible to all types. Growth experiments in grapefruit (GF) and KL indicated that after leaf infiltration the A type continued to grow for 10 days in GF and KL. The B and C types reached populations 100 times lower than the A in KL, and the C type stopped growing after six days in GF and then the population declined sharply. Currently, the genetic characterization of strains isolated from the field is in progress to select representative strains for evaluating modern diagnostic techniques.

Control of citrus canker caused by strains of Xanthomonas axonopodis pv citri susceptible and resistant to copper. B. I. CANTEROS. INTA EEA Bella Vista, 3432, Ctes., Argentina. Publication no. P-2002-0015-CRA.

Citrus canker has been controlled by copper-containing bactericides for the last twenty five years, until copper resistant strains of X. a. pv citri became prevalent in 1994 in one of the citrus-growing region of Argentina. Preliminary data suggests that the Cu resistance is plasmid encoded. Data from ten years of spray trials on grapefruit seedlings infected with Cu-susceptible or Cu-resistant strains were analyzed. Cu-resistant strains were those that grew on lima bean agar plus 200 ppm of copper sulfate and in water suspensions of bactericides containing 1.5 grams metallic copper per liter during 36 hours. Cu-susceptible strains died after 30 minutes in water plus Cu. Addition of mancozeb to copper products eliminated Xac in water after 15 min. and gave excellent control of canker in the field. Other mixtures of Cu products, such as addition of ferric sulfate were effective but phytotoxic, and a product based on inorganic Cu and organic cation was effective only when mixed with 0.3 per cent of Cu compounds containing at least 50 percent metallic Cu. Presently, copper plus mancozeb are used routinely in groves infected by Cu resistant strains of Xac, whereas, Cu compounds alone can still be used in plants infected by Cu susceptible strains.

Estudio de la interaccion planta-patogeno entre Musa spp. y Mycosphaerella fijiensis. WASHINGTON CÁRDENAS, María Isabel Jiménez, y Rodolfo H. Maribona. CIBE, ESPOL, Guayaquil, Ecuador. wcardena@espol.edu.ec. Publication no. P-2002-0016-CRA.

El recurso fitogenético de mayor valor social y comercial en Ecuador lo constituye el banano (Musa spp.). La principal fitopatología que amenaza el cultivo de banano en América y en otras regiones del mundo es la enfermedad foliar conocida como Sigatoka negra causada por el hongo Mycosphaerella fijiensis. El control de la enfermedad por medio de fungicídas puede representar un rubro muy fuerte en los costos de producción y tornarse en un peligro para el ecosistema. El estudio de los mecanismos moleculares de la interacción planta-patógeno son muy importantes para poder entender los procesos infecciosos y de defensa que presenta la planta frente a un posible patógeno. La identificación de las moléculas involucradas nos ayudarían a establecer soluciones de fondo en diversas fitopatologías. En el presente trabajo se trató de identificar proteínas del M. fijiensis que interaccionen con las de Musa spp. Los extractos proteicos de hojas se incubaron con micelios y se identificaron cambios en los patrones proteicos por SDS-PAGE. Se identificó una banda proteica de 68 kDa presente en Musa spp. que parece interactuar con las membranas de M. fijiensis ya que desapareció (se precipitó) y no se detectó en las incubaciones mixtas planta-hongo. Por otro lado, se observó la aparición de una nueva banda de 41 kDa en las incubaciones mixtas que no se observó en las muestras de hongo ni de banano.

Evaluación de fungicidas para el control de agallas en mango. G. CASTELLANO, R. Camacho, Y. Fonseca, J. Rivas, and N. Guanipa. Instituto de Investigaciones Agrícolas, apdo. 1316. Maracaibo, Venezuela. Publication no. P-2002-0017-CRA.

A fin de evaluar la efectividad de diferentes productos químicos sobre el control de agallas (Fusarium decencellulare) en el cultivo del mango Haden, se realizo un trabajo de investigación en la finca El Carrusell, ubicada en el Municipio Urdaneta del Estado Zulia, donde las condiciones edafoclimaticas son de 500-600 mm de precipitación promedio anual, temperatura de 28°C y una humedad relativa de 75, suelos clasificados como aridisoles con una superficie arenosa y un horizonte argilico de profundidad variable. Se utilizo la variedad Haden y los productos evaluados fueron Daconil a razón de 10 gr/lt. Mezcla de cobrex + Ridomil en dosis de 7,5 gr/lt agua + 3.5 gr/lt agua y el Aleitte 80 en dosis 3.5 gr/lt agua. El diseño utilizado fue un completamente aleatorizado con 8 arboles/tratamiento. Las variables medidas fueron incidencia de agallas, No. Agallas/p. No. de frutos/p y peso de frutos. Los resultados preliminares indican que el productos que ha tenido más efectividad para el control de agallas es el cobrex + Ridomil (T(2)) donde el número promedio de agallas/p resulto ser 23 con un peso promedio por planta 67,2 kg. y en 2do. Lugar de efectividad se encuentra el Aliette 80 (T(3)) con un número de agallas/p de 24 y un promedio por planta de 69,7 kg. El número de agallas por planta nos daría un indicativo que la aplicación de productos químicos acompañados de otras prácticas es efectiva para reducir la incidencia de agallas en mango.

Estudio del efecto fitotoxico de filtrados de cultivos de Fusarium oxysporum f. sp. cubense sobre hojas de banano. BÁRBARA COMPANIONI, Mayda Arzola, Orlando Borrás, Ramón Santos, Yania Rodríguez, Marais Mosqueda, and María Cristina Pérez. Centro de Bioplantas, Universidad de Ciego de Avila, Carretera a Morón Km 9, CP. 69 450, Cuba. Publication no. P-2002-0018-CRA.

Muchos genotipos y la mayoría de las áreas de producción bananera se afectan por el marchitamiento causado por Fusarium oxysporum f. sp. cubense. Las técnicas de selección rápida de la resistencia a las enfermedades a nivel de órganos y la selección de la resistencia in vitro tienen importantes ventajas con respecto a la selección sobre plantas en condiciones de campo. Es importante al momento de estandarizar un bioensayo para la selección de la resistencia a enfermedades, la evaluación del efecto del agente de selección sobre diferentes especies y partes dentro de una misma planta. Con el interés de conocer el mejor lugar de expresión fitotóxica del filtrado crudo concentrado del hongo (80%) en clones de banano, se realizó el presente trabajo. Se probaron dos clones: Gros Michel (susceptible) y FHIA-01 (resistente). El efecto fitotóxico del filtrado crudo concentrado (80%) se ensayó mediante el bioensayo de punteadura sobre el limbo de diferentes posiciones y tipos de hojas dentro de una misma planta. En los resultados se pudo observar que en el factor clon se observaron diferencias significativas donde se encontraron las mayores áreas necróticas en el clon Gros Michel. Sin embargo, en el factor posición de la hoja no se encontraron diferencias estadísticas. Las mayores diferencias entre el clon susceptible y el resistente se lograron cuando se emplearon las hojas 3, 4 y 5.

Interacción de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Smith, 1897) Vauterin et al. 1995 con hospedantes resistentes, medianamente resistentes y susceptibles de Phaseolus vulgaris L. Nancy Contreras (1), Gustavo Trujillo (2), Orangel Borges (2), y Fernando Centeno (3). (1) Posgrado de Fitopatología, Decanato de Agronomía, Universidad Centroccidental Lisandro Alvarado. Apdo. Postal 400, Cabudare, estado Lara, Venezuela. e-mail nacon99@Yahoo.com. Fax 051-592571; (2) Facultad de Agronomía, Universidad Central de Venezuela, Apdo Postal 4579; (3) Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias-CENIAP-Maracay. Apdo. Postal 4653. Publication no. P-2002-0019-CRA.

Genotipos de caraota negra (Phaseolus vulgaris L.) resistentes, moderadamente resistentes y susceptibles inoculados a los 17 y 27 días después de la siembra con la bacteria Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli, fueron muestreados a los 14 y a los 21 días después de la inoculación. Se cortaron secciones muy pequeñas de tejido foliar de aproximadamente 1 mm(^2) en presencia de glutaraldehído al 2% y se siguió el protocolo utilizado por Cafati y Saettler con ligeras modificaciones. Posteriormente se hicieron cortes finos de 1µm en ultramicrótomo para tinción policromática. En el microscopio óptico se seleccionaron los bloquecitos para cortar secciones ultrafinas de 200-400 Angstrom y se colorearon en acetato de uranilo al 2% y en citrato de plomo al 4% para su observación en el microscopio electrónico de transmisión. Se visualizaron los cambios ocurridos a nivel celular en la epidermis, mesófilo y tejido vascular. En el hospedante resistente se observó el fenómeno de encapsulación, en el hospedante medianamente resistente se observaron pocas bacterias en los espacios intercelulares y la formación de vesículas entre el plasmalemma y la pared celular. En el hospedante susceptible mayor número de bacterias en los espacios intercelulares, condensación del citoplasma y desintegración de organelas. Estos resultados concuerdan con la literatura; sin embargo en esta investigación se confirmó que la bacteria entró al mesófilo, rompió la lámina media y penetraron al tejido vascular (vasos del metaxilema) masas de células bacteriales, lo que representa una contribución en los estudios histológicos relacionados con la patogénesis en la relación patógeno-hospedante.

Respuesta diferencial de Colletotrichum acutatum y del tejido foliar en plantas de fresa. Francisco T. Arroyo Cordero (1), Javier Moreno Onorato (2), Gregorio García Herdugo (2), and FERNANDO ROMERO MUÑOZ (1). (1) C.I.F.A. “Las Torres-Tomejil”, Alcalá del Río; (2) Dep. Biología Celular, Universidad de Sevilla, España. Publication no. P-2002-0020-CRA.

La Antracnosis de la fresa, causada por Colletotrichum acutatum, es una de las enfermedades más importantes que afectan a este cultivo a nivel mundial. Los estados asintomáticos en la planta, fundamentalmente en hojas, y su posible implicación en el ciclo biológico y de patogénesis han sido el motivo de este estudio. Se depositaron en haz y envés de hojas del cv Camarosa gotas de 100 µl de una suspensión de esporas de 10(^6) e/ml permaneciendo en cámara de ambiente controlado a 25ºC y fotoperíodo de 16h luz al 100% de HR. Se tomaron muestras de tejido a las 4, 8, 12, 16, 20, 24, 36, 48, 72, 96 y 120 horas después de la inoculación (hpi.). La formación de apresorios y de estructuras conidiógenas se inició dentro de las 8 hpi; los apresorios en haz suelen ser sésiles mientras que en envés proceden en general de tubos germinativos largos. Hifas y conidias produjeron abundantes esporas secundarias. A partir de este momento la respuesta patogénica se hace diferencial en ambas superficies comenzando un proceso de lísis de esporas en haz que se generalizó a las 120 hpi. En el tejido foliar se observaron diferencias entre ambas superficies con lesiones de hasta 10 mm en envés y ninguna sobre haz. La supervivencia del patógeno aislado a los 30 días del tejido foliar, sugiere la posible participación de estructuras infectivas del mismo en la ocurrencia de enfermedad en los campos de cultivo.

Begomovirus en el cultivo de la papa (Solanum tuberosum) en Cuba. MARLENE CORDERO (1), Pedro Ramos (2), Gloria González (3), Surey Valdés (3), Daniel García (1), Ana Estévez (4), Ursula Ortíz (4), y Keren Hernández (1). (1) Instituto de Investigaciones Hortícolas Liliana Dimitrova. Carretera Bejucal-Quivicán, Km 33 ½, Quivicán, La Habana, Cuba; (2) Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB).División de Plantas P.O.Box 6162, Ciudad Habana, Cuba; (3) Instituto de Investigaciones en Sanidad Vegetal (INISAV). Calle 110 #515 Playa, Ciudad Habana, Cuba; (4) Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Carretera de Tapaste. Km 3 ½. San José de las Lajas, La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0021-CRA.

En la Estación Experimental de Papa y Fibras se detectó por primera vez en Cuba la presencia de un begomovirus en plantas de papa que mostraban síntomas de mosaico amarillo. También se determinó la incidencia de plantas con síntomas típicos de geminivirus en las plantaciones de esta solanácea, en la localidad de Boyeros y San José, durante la etapa de desarrollo del cultivo y la presencia de esta enfermedad en regiones paperas importantes de la provincia Habana. Las pérdidas ocasionadas por geminivirus en Boyeros se determinaron durante los años 1992 y 1994. La identificación del agente causal se realizó mediante microscopía óptica, estudio de su rango de hospederos (por injerto y mecánico), Southern Blot, amplificación del genoma viral por RCP y estudio del patrón de restricción del fragmento amplificado. La secuenciación parcial del fragmento amplificado confirmó la presencia del “Taino Tomato Mottle Virus” (TToMoV), su incidencia hasta el presente ha sido baja; aunque en algunos materiales del Programa de Mejoramiento Genético se han encontrado el 100% de sus plantas afectadas por este virus, registrándose disminuciones en los rendimientos desde 19% hasta 43.77%. Se trasmite a través de los tubérculos y se ha encontrado en forma de complejo con el Virus X de la Papa (PVX) y con el Virus del Enrollamiento de la Hoja de Papa (PLRV), incrementando esta última asociación la susceptibilidad al TToMoV. La presencia de geminivirus en el cultivo de la papa ha sido encontrada hasta el presente en Güira de Melena, San José y Güines.

Estudio del comportamiento de variedades de papa (Solanum tuberosum L.) frente al plrv. MARLENE CORDERO, Mercedes Cruz, Niurka Fernández, y Daniel García. Instituto de Investigaciones Hortícolas Liliana Dimitrova. Carretera Bejucal-Quivicán, Km 33 ½, Quivicán, La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0022-CRA.

In situ PCR: a technique for locating phytoplasmas in coconut embryo tissue. I. Cordova, C. Oropeza, P. JONES, and N. A. Harrison. Centro de Investigacion Cientifica de Yucatan, Mexico; IACR-Rothamsted, Harpenden, Herts.,UK; University of Florida, Fort Lauderdale, Florida USA. Publication no. P-2002-0023-CRA.

There is general acceptance that while phytoplasmas can be transmitted in nature by insect vectors, grafting and dodders, there is no published evidence that they can be transmitted through seed. Phytoplasmas are obligate plant pathogens that live in the phloem cells of their host. The use of sensitive DNA amplification tests has shown that phytoplasma-specific bands can be amplified from seed collected from phytoplasma-infected plants. Ultrathin sectioning and transmission electron microscopy of seed and embryo tissues to search for phytoplasmas is costly and time consuming. Lethal yellowing disease is the major constraint on coconut production in the Caribbean and Latin America, threatening rural livelihoods and hindering development. The fear of seed transmission of the phytoplasma is restricting the international exchange of germplasm. In this paper we report on experiments using in-situ PCR to attempt to locate the lethal yellowing phytoplasma in coconut embryos.

Alternative control of Tetranycus urticae (Koch) and Thrips florum Shmutz on banana cultivation on the autonomous region of Madeira. João Alcino da Silva and Luís Nuno V. P. Ribeiro. Direcção Regional de Agricultura da Regional Autónoma da Madeira - Portugal. Direcção de Serviços de Produção Agrícola/Divisão de Bananicultura. Caminho das Voltas - Bom Sucesso. Apartado 3035. P - 9038 - Funchal - Codex. Publication no. P-2002-0024-CRA.

Paenibacillus macerans and Trichoderma harzianum enhance transplant growth and suppress fusarium crown and root rot in Florida tomato production. L. DATNOFF and K. Pernezny. University of Florida-IFAS, Everglades Research and Education Center, Belle Glade 33430. Publication no. P-2002-0025-CRA.

Paenibacillus macerans (PM) and T. harzianum (TH) were evaluated for promoting plant growth and suppressing Fusarium crown and root rot (FCRR) under fumigated and non-fumigated field conditions. A soil-less mix was amended with PM at 3.6 × 10(^8) cfu/tray cell and TM at 1 × 10(^6) cfu/tray cell. ‘BHN 422’ tomato seeds were incorporated. After five weeks, plants were transplanted into a commercial tomato field with a previous history of FCRR. In the greenhouse, TH and PM alone or in combination increased (P=0.05) petiole numbers between 6 to 9%, heights 8 to 18.8%, stem caliper 10 to 13.6%, leaf area 7 to 21%, petiole fresh weight 25 to 38% and root fresh weight 50%. In the field, petiole numbers increased between 3 to 5%, heights 2 to 8% and stem caliper 1 to 7%. TH reduced (P=0.05) the severity of FCRR by 12% and PM by 9% in comparison to the control in the nonfumigated treatments. No differences were observed between the biologicals and an untreated control in methyl bromide-treated plots. These results support the use of microorganisms for growth promotion and biocontrol.

Caracterización molecular de la diversidad genética en algunos aislamientos promisorios de Trichoderma spp por RAPD. Belkis Peteira Delgado (1), Benedicto Martínez (1), Yudilai Muñiz (1), y Ileana Miranda (2). (1) Departamento de Fitopatología, División de Protección de Plantas; (2) Departamento de Matemática, Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA). Carretera de Jamaica y Autopista Nacional, Apdo. 10, San josé de Las Lajas, La Habana, Cuba. E-mail: bpeteira@id.censa.edu.cu. Publication no. P-2002-0026-CRA.

Para la caracterización molecular de aislamientos de Trichoderma de interés para el control de Fusarium spp., la extracción de ADN se realizó a través del método de Dellaporta. La reacción de amplificación se desarrolló según las especificaciones de la firma Operón Technologies, para la mezcla de reacción y el programa de amplificación. Se emplearon cebadores de los Kits OPA y OPF. Los productos de la PCR se visualizaron al UV por electroforesis en gel de agarosa 1,5% en TBE y tinción con bromuro de etidio. Las bandas se reportaron como: presentes [1] y ausentes [0], creándose una matriz de valores binarios que se analizó a través del método UPGMA, utilizando la métrica de Nei y Li para generar una matriz de coeficientes de similitud entre accesiones que se utilizó para la construcción de un dendograma. También se realizó el análisis de componentes principales. Se empleó el software SPSS para Window(SPSSWIN). Fue posible mediante la aplicación de los marcadores RAPD, la caracterización molecular de Trichoderma spp, corroborándose la variabilidad genética presente en este organismo después del estudio de algunos aislamientos provenientes de diferentes zonas geográficas del país.

Genetic diversity of Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson in Cuba. M. Díaz (1), E. L. Peralta (1), A. Iglesias (1), V. Pazos (2), O. Carvajal (3), J. Pérez (3), E. A. Gigliotti (4), and L. E. Camargo (5). (1) CENSA, La Habana, Cuba; (2) Havana University, Cuba; (3) EPICA Matanzas, Cuba; (4) FAI-CCA, UFSCAR, SP., Brazil; (5) ESALQ-USP, SP, Brazil. Publication no. P-2002-0027-CRA.

Results on the characterization and variability of plant trypanosomatids; some lessons for characterization of mollicutes diagnosed in coconut palms? M. DOLLET. CIRAD, TA30/G, Campus International de Baillarguet, 34398 Montpellier Cedex 5, France. Publication no. P-2002-0029-CRA.

In Latin America, besides lethal Yellowing, coconuts are affected by other intraphloemic parasites : Phytomonas spp. (Trypanosomatidae). We have performed a characterization of these microorganisms, which involved different steps from serological studies to the amplification and sequencing of particular genes, and progressing from only a few to several isolates. After completion of isoenzymes studies it appeared coconut trypanosomatids (Hartrot) were different from those of oil palm (Marchitez sorpresiva). However recent studies made on the sequences of the SL RNA gene, and 5S rRNA gene showed there were two different groups of trypanosomatids, the first one containing only coconut isolates and the second containing coconut, oil palm, and Alpinia purpurata isolates. But according to a selective sampling- due to various circumstances- we could envisage that group I contained some oil palm isolates if there was the opportunity to succeed in in vitro culturing more oil palm isolates. Using 5S rRNA gene sequences we could conclude that some trypanosomatids found in some European plants were probably introduced from latin America through plant material exchanges. Further characterization, carried out by the seqencing of SL RNA genes, demonstrated that several loci could be amplified with the same primers while it was expected only one sequence in one given trypanosomatid. Studies using the SSU rRNA gene were not found to be more informative. These results brought us some considerations about the investigations carried out on coconut Lethal Yellowing, regarding the world of mollicutes existing in or on plants.

Evaluación de las variedades resistentes al Amarillamiento Letal del Cocotero en Honduras. M. M. Doyle (1), Estela Aguilar (1), MELISSA CASTILLO (1), Michel Dollet (2), y Nigel Harrison (3). (1) Zamorano, Apdo. Postal 93, Tegucigalpa, Honduras; (2) CIRAD, Montpelier, Francia; (3) Universidad de Florida, Fort Lauderdale, EE.UU. Publication no. P-2002-0030-CRA.

Honduras esta atravesando actualmente por una epidemia de Amarillamiento Letal del Cocotero (ALC), que fue reportada en 1995. Los programas de rehabilitación han comenzado a replantar las costas e islas hondureñas con variedades resistentes como el híbrido Mapan y los enanos malayos. La plantación más grande de híbridos Mapan en Honduras pertenece a la Standard Fruit Company, que inició la replantación antes de la epidemia de ALC y ha sido objeto de múltiples investigaciones debido a que un alto porcentaje (approximately equal to 70%) de los híbridos presentan síntomas similares a los del ALC. Aquí se reportan los resultados de los análisis para la detección del fitoplasma causante del ALC usando primers específicos (LYF1/LYR1 N. Harrison). Se detectó ADN del fitoplasma en 6% de las muestras tomadas de tejido del tronco. No se obtuvieron muestras positivas del análisis realizado para la detección del nemátodo causante del anillo rojo (Bursaphelenchus cocophilus), de las Phytomonas, causantes de la enfermedad de Hartrot, de la pudrición del cogollo por Phytophthora sp. Por esto se concluyó que los síntomas en la finca Salado Lis-Lis se pueden atribuir a un factor abiótico como exceso de agua y no al ALC. Los enanos malayos analizados en la costa atlántica de Honduras han presentado un comportamiento sobresaliente, pues se estima que solo 1% de la población de enanos presenta síntomas de amarillamiento, atribuibles al ALC.

Differences in virulence and cultural and biochemical characteristics of Macrophomina phaseolina isolates collected from Puerto Rico and the Dominican Republic. RODRIGO ECHÁVEZ-BADEL, R. Campo-Arana, and C. Betancourt. Departments of Crop Protection and Biology, University of Puerto Rico, Mayagüez Campus, Mayagüez, Puerto Rico 00681-9030. Publication no. P-2002-0031-CRA.

Charcoal rot or ashy stem blight caused by the soil-borne fungus Macrophomina phaseolina (Mp) is recognized as an important disease of bean (Phaseolus vulgaris) in Puerto Rico (PR) and the Dominican Republic (DR). Severe symptoms occur especially when bean seedlings or adult plants are stressed from moisture deficits. Differences in virulence and cultural, and biochemical characteristics were obtained among PR and DR isolates of Mp in this study. PRMp2 was more virulent than PRMp1. However, DRMp2 was more virulent than either PRMp2 or DRMp1. Mycelia morphological characteristics and sclerotia size were similar in the DR isolates but different from those of the PR isolate. There were not significant differences in sclerotia size and mycelia radial growth of each isolate under light or dark conditions. Analysis of protein patterns of the PR and DR isolates was performed by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Protein profiles of DR isolates were similar but different from that of PR isolate (PRMp2).

Bean golden mosaic virus is the etiological agent of bean golden mosaic disease in Cuba. A. L. ECHEMENDÍA, P. L. Ramos, R. Peral, A. Fuentes, G. González, F. Morales, and M. Pujol. First and fifth authors, Plant Protection Institute, Cuba. Email: ggonzalez@inisav.cu; seventh author, International Center of Tropical Agricultural, Colombia; second, third, fourth and seventh authors, Center of Genetic Engineering and Biotechnology. Publication no. P-2002-0032-CRA.

Cuba, the first report of bean golden mosaic (BGM) disease associated with high population of Bemisia tabaci in Cuba was made in the 70’s. Bean leaves (Phaseolus vulgaris L.) showing typical golden mosaic symptoms were gathered from Havana, Matanzas, Santa Clara and Holguín fields during 1998-1999. The same DNA extractions were further analysed by PCR using two degenerate primer sets (PAL1v 1978- PAR1c 715 and PAL1c1960- PAR1v 722). Fragments of approximately 1.4kb and 1.3kb were amplified and cloned. RFLPs analysis of the cloned 1.4kb fragments was performed with restriction enzymes indicating that they shared identical restriction pattern. In addition, the nucleotide sequence for a clone corresponding to Holguin´s infected bean plant was obtained and compared using BLAST. The relatedness of the Cuban isolate with the other begomoviruses was confirmed by multiple sequence alignments of the common region (CR) and partial nucleotide sequences of replicase (rep) gene. The best percentage of identity for rep was 94% with any of BGMVs mentioned above. In the case of CR, the scores were BGMV-GA 93%, BGMV-MX and BGMV-PR 92% and BGMV-DR 91%.

Aislamiento e identificacion de Alternaria sp. en flores, hojas y tallos de Tagetes erecta "marigold". MARIO R. ESPARZA -MANTILLA. Laboratorio de Fitopatología. Departamento de Microbiología y Parasitología. Facultad de Ciencias Biológicas. Apdo 315. Universidad Nacional de Trujillo. Perú. Publication no. P-2002-0033-CRA.

El marigold se cultiva principalmente en: México, Estados Unidos, España, Italia, Perú, Argentina, Ecuador y Venezuela. En los últimos años este cultivo se ha incrementado debido a la utilización de sus flores como materia prima para la obtención de oleorseína y xantofila usados en la industria farmacéutica, ávicola y alimentaria. En el Perú el marigold es un cultivo agrícola de desarrollo intensivo; para ello es necesario investigar la presencia de agentes fitopatógenos como Alternaria sp. Metodológicamente se seleccionaron plantas de Tagetes erecta " marigold " de cuatro meses de edad, las muestras estuvieron conformadas por flores, hojas y tallos con lesiones cuyos síntomas fueron manchas oscuras. Se analizaron las lesionas con KOH al 10%, en el microscopio a 400 aumentos (para determinar la presencia de dictiosporas). Luego se lavaron en alcohol al 70% por 30 segundos, se desinfectaron con NaCLO al 1% por tres minutos, después se lavó cuatro veces con agua destilada estéril. Cada lesión de un cm(^2) se sembró en placas con Agar Papa Sacarosa (APS) e incubó a temperatura ambiental por cuatro días; una vez aisladas las colonias características de Alternaria sp. se sembraron en tubos con APS inclinado, para obtener el cultivo puro, luego se evaluó el crecimiento en microcultivo usando la técnica del bloque según Krugg (1999). Posteriormente se realizó la identificación con la clave taxonómica de Barnett (1960). Finalmente se logró el aislamiento e identificación de Alternaria sp.; siendo estadísticamente mayores los aislamientos a partir de hojas con respecto a los de tallos y flores.

Establecimiento de un procedimiento para la transformación genética de la piña (Ananas comosus (L.) Merr). PATRICIA ESPINOSA (1), Jose Carlos Lorenzo (1), Ariel Arencibia (2), Lourdes Yabor (1), Alitza Iglesias (1), y Lázaro Hernández (2). (1) Centro de Bioplantas, UNICA CP69450, Cuba; (2) Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología AP 6162. Cuidad Habana CP10600. Cuba. Publication no. P-2002-0034-CRA.

En este trabajo se optimizan las condiciones para la transformación genética de la piña mediante Agrobacterium tumefaciens. Para esto se evaluaron diferentes agentes selectivos como la kanamicina, higromicina y fosfinotricina en la callogénesis, enraizamiento, micropropagación convencional y en biorreactores de inmersión temporal (BIT). Se demostró que la kanamicina no es un agente de selección adecuado para la transformación de la piña. La higromicina inhibió significativamente el desarrollo y formación de vitroplantas a concentraciones entre 20 y 30 mg/L. La fosfinotricina redujo marcadamente la micropropagación en biorreactores de inmersión temporal a la concentración de 2.5 mg/L. A concentraciones entre 0.2 y 1 mg/L tuvo un efecto inhibitorio en la formación, multiplicación y regeneración de callos embriogénicos. El tiempo óptimo de co-cultivo para la transformación se estableció a las 24 horas. La cefotaxima a la concentración de 200 mg/L demostró detener el crecimiento de Agrobacterium tumefaciens y no afectar el desarrollo del cultivo in vitro de la piña. Bajos estas condiciones se establece un protocolo para la transformación genética de este cultivo. Se escaló el procedimiento de transformación con el uso de Agrobacterium tumefaciens que porta plásmidos que contienen los genes antifúngicos quitinasa/glucanasa, quitinasa/ap24 y el gen bar. Se demostró una eficiencia de transformación con el uso de estas construcciones de 1.8% para una (AT2260(pHCG59)) y 6.6% para la otra (AT2260(pHCA58)) respectivamente. Mediante la reacción en cadena de la polimerasa se comprobó la presencia del gen bar en las plantas seleccionadas.

Nuevos registros fúngicos en leguminosas de la Estación de Pastos y Forrajes de Niña Bonita. Giselle Estrada, Danay López, y Maria Ofelia López. Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Publication no. P-2002-0035-CRA.

Las principales enfermedades que inciden en los pastos son las bacterianas y fúngicas, y por estas últimas se estiman pérdidas que fluctúan del 50 - 100% de la producción total. Dentro de los organismos plagas se señalan los hongos, los cuales poseen un mayor peso, no sólo por los daños que producen sobre los rendimientos, sino porque también provocan alteraciones importantes sobre los parámetros del producto cosechado. Las micotoxinas son otro de los daños que ocasionan estos organismos, y son producidas por el patógeno durante el proceso de parasitismo. El objetivo de este trabajo fue determinar especies de hongos presentes en algunos pastos de la Estación de Pastos y Forrajes de Niña Bonita. Se tomaron y analizaron por métodos convencionales muestras de 11 especies de leguminosas a partir de Marzo del 2000 hasta Febrero del 2001. Las muestras colectadas presentaban síntomas de manchas foliares principalmente. Se determinaron 22 especies de hongos, de los cuales 16 son nuevos registros para el país. El género Cercospora fue el más observado, siguiéndole en importancia especies de Alternaria, Colletotrichum y Corynespora. Hay que destacar que en la mayoría de las muestras se observó Fusarium incarnatum que aunque tiene poca importancia como fitopatógeno, es un oportunista con gran capacidad de pudrición y además puede resultar toxicogénico.

Transgenic papaya: a case of technology transfer to Venezuela. G. FERMIN (1,2) and D. Gonsalves (1). (1) Dept. of Plant Pathology, Cornell.Univ.- NYSAES, Geneva, NY 14456. USA; (2) Univ. de Los Andes, Merida, Venezuela. Publication no. P-2002-0036-CRA.

Resistance to Papaya Ringspot Virus (PRSV) in PRSV coat protein-transformed papaya plants relies on sequence similarity between the CP transgene and the challenging virus. Rainbow transgenic papaya, which shows very good resistance to PRSV in Hawaii, is highly susceptible to two different Venezuelan strains of PRSV isolated from El Vigia and Lagunillas, Merida, Venezuela. The CP gene of these two different isolates PRSV.VE.EV and PRSV.VE.LA were used to obtain transgenic resistant plants by transformation via Agrobacterium tumefaciens. Analysis of transgenic plants includes the Ro, R1 and F1 generations. Resistance was isolate-dependent and due to a single insertion. The story of this case in biotechnology transfer from Cornell University to Universidad de Los Andes, including recent opposition to our approach in Venezuela, is presented.

Combate del Dasheen mosaic potyvirus (DMV) en malanga (Xanthosoma spp.) mediante la preinmunizacion con una estirpe debil (DMV-B). S. QUINTERO FERNÁNDEZ, A. A. Rodríguez Nodals, Arlene Rodríguez Manzano, y H. Olivera Rodríguez. Instituto de Investigaciones Fundamentales en Agricultura Tropical “Alejandro de Humboldt” (INIFAT). Calle 1 y 2, Sgo. de las Vegas, Ciudad Habana, Cuba. Tel. 57-9308, 57-9010. Fax. 57-9014. E-mail: inifat@ceniai.inf.cu. Publication no. P-2002-0037-CRA.

El combate de los virus de las plantas, se ha intentado por muchos medios: quimioterapia, medidas fitotécnicas, variedades resistentes, semilla certificada libre de virus, protección cruzada o “vacuna”, termoterapia, hidrotermoterapia, electroterapia, cultivo de meristemas, ingeniería genética y otras técnicas o combinaciones de éstas, según el virus. El Dasheen mosaic potyvirus (DMV) fue identificado en Cuba en malanga (Xanthosoma spp. y Colocasia esculenta) en 1987, eliminado del material de propagación en 1989, purificado y diagnosticado mediante UM-ELISA y otros métodos de alta sensibilidad. Su purificación permitió la obtención de 20 µg/g de tejido viroso, con el que se realizó la caracterización molecular en trabajos posteriores. La productividad perdida de clones comerciales, fue recuperada al ser eliminado el virus de la “semilla”. Fueron obtenidas dos formas o estirpes del virus (DMV-S y DMV-B), las que fueron reinoculadas en la “semilla” libre del DMV. Después de cuatro años, disminuyeron significativamente, los rendimientos de estos clones reinoculados. Las plantas que fueron inoculadas con el aislado DMV-B, y cultivadas en parcelas adyacentes a las que poseían el aislado DMV-S, a los diez años, disminuyeron sus rendimientos solamente en un 13 a 16%, y presentaban los síntomas del DMV-S; mientras que una cantidad de estas plantas, altamente significativa (entre 84 y 87%), permaneció con rendimientos normales y solamente mostraban síntomas del DMV-B, lo que permitió suponer un efecto protector del aislado DMV-B contra el DMV-S (estirpe severa), en condiciones de campo, por tiempo prolongado. Este procedimiento representó el mejor método de combate contra este virus

Identificación de qtls en una línea de cebada (Hordeum vulgare) con niveles extremos de resistencia parcial a la roya (Puccinia hordei) a través del mapeamiento genotípico gráfico. E. Fernández (1); P. Van den Berg (2); R. E. Niks (2), y P. Lindhout (2). (1) Departamento de Fitopatología Vegetal. División de Protección de Plantas. Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria Cuba; (2) Plant Breeding Department. Wageningen Agricultural University. The Netherlands. Publication no. P-2002-0038-CRA.

En el patosistema cebada- roya pueden observarse la resistencia monogénica (gobernada por los genes mayores Rph ) y la resistencia poligénica (debida a la acción conjunta de los genes Rphq ). Varios de genes mayores han dejado de ser efectivos contra esta enfermedad y es necesario profundizar en la localización y determinación del efecto de los loci asociados a la resistencia parcial. Producto de la acumulación de genes menores a través de la selección repetida en la población del cruce entre dos cultivares; Vada y Cebada Capa; Parlevliet y Kuiper (1985) obtuvieron algunas líneas promisorias como la 17-5-16. Se determinó la composición de QTLs asociados a la resistencia parcial a la roya en la línea de cebada 17-5-16 a través del mapeamiento genotípico con marcadores AFLP y sobre la base de los mapas obtenidos por Qi y col. (1998) utilizando un diseño de líneas isogénicas recombinantes en F8 y F9. De los 10 QTLs identificados en Vada y Cebada Capa, al menos 9 están presentes en la línea 17-5-16, lo cual explica su nivel extremo de resistencia parcial.

Efecto de métodos de control de malezas en el establecimiento de Glycine wightii (Wight and Arn.) verdc. como cobertura viva en cítricos. H. FLORES G., J. L. Medina Pitalúa, y J. A. Domínguez Valenzuela. Departamento de Parasitología Agrícola. Postgrado en Protección Vegetal; Universidad Autónoma Chapingo. Carretera México-Texcoco, Km. 38.5; C.P. 56230; Chapingo, México. Publication no. P-2002-0039-CRA.

El presente trabajo se dan a conocer los avances de tesis referentes al uso de métodos de control de malezas en el establecimiento de Glycine wightii como cobertura viva, caracterizándose esta por ser una leguminosa utilizada en la protección del suelo contra la erosión, así como el control biológico de malezas por desplazamiento y competencia en cítricos. Glycine wightii tiene el inconveniente de que en sus primeras etapas fenológicas es susceptible a la competencia por malezas debido al tamaño pequeño de sus semillas y plántulas. Para el establecimiento de esta especie se utilizará al principio la leguminosa Styzolobium deeringianum, conocida como pica pica mansa o nescafé ; es una especie agresiva y de fácil establecimiento que proporciona una cobertura total en el cultivo, desplazando las malezas como Sorghum halepense, cuya agresividad la hace la maleza más importante en las zonas citrícolas de Veracruz. Por lo anterior, se está evaluando el efecto de S. deeringianum como controlador inicial de malezas en el establecimiento de G. wightii en cítricos, comparado con métodos tradicionales de control como el químico y el corte para lograr el establecimiento de G. wightii. en el menor tiempo posible, con el menor uso de recursos.

Expresión de antigenos recombinantes y obtención de anticuerpos especificos para la detección de begomovirus que afectan el tomate en Cuba. D. Fonseca (1), Y. Martínez (1), M Quiñones (1), y C. Gutiérrez (2). (1) Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, P.O. Box 10 San José de las Lajas, Habana, Cuba; (2) Centro de Biología Molecular “Severo Ochoa”, Universidad Autónoma, Cantoblanco 28049, Madrid España. Publication no. P-2002-0040-CRA.

Expresión de la proteina recombinante correspondiente al gen-n del tomato spotted wilt virus. D. Fonseca, M. Quiñones, y Y. Martínez. Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria. yamila@id.censa.edu.cu. Publication no. P-2002-0041-CRA.

El bronceado del tomate enfermedad producida por el Tomato Spotted Wilt Virus (TSWV) es reconocida como una de las patologías de plantas de mayor interés, por su alta incidencia en cultivos tanto hortícola como ornamentales. El TSWV es considerada en nuestro país una entidad cuarentenada, no detectándose hasta el momento su presencia. El objetivo de este trabajo estuvo encaminado a la obtención de la proteína de la cápsida del virus por vía recombinante. Se realizó el clonaje del gen que codifica para esta proteína en el vector pET-15b y en los experimentos de expresión llevados a cabo se observó la aparición de una banda de 29 kDa, que corresponde con el peso molecular previamente estimado, la cual no apareció en los controles no inducidos. La especificidad de la proteína obtenida fue testada por “Western blot”, utilizando antisueros de referencia. Estos resultados permitirán la obtención de anticuerpos de elevada especificidad de vital importancia, para el desarrollo de nuestra red de vigilancia y control en el campo de la sanidad vegetal, además de constituir una herramienta imprescindible para los laboratorios de cuarentena instituidos en nuestro país.

Aplicación de la técnica dot-oro para el diagnóstico de TMV y ToMV en semillas de tomate y pimiento. CARIDAD FONT, Erick Miranda, Nancy Montero, Ma de los Ángeles González, Sara Sánchez, Javier Sampedro, Acela Fonseca, Neyda Arencibia, and Yadmel González. Laboratorio de Virología. Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 # 514 e/ 5(^ta) B y 5(^ta) F, Playa. Ciudad de La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0042-CRA.

"Fitopatologia", 35 años como revista cientifica regional. E. R. FRENCH. Asociación Latinoamericana de Fitopatología (ALF), C.I.P.-Apartado 1558, Lima 12. Peru. Publication no. P-2002-0043-CRA.

La Revista FITOPATOLOGIA tuvo su inicio en Santiago de Chile con la Dra. Dora Volosky como Directora (1965-1969), publicándose el Volumen 1 en Chile, el Vol. 2(1) en Costa Rica y el No. 2(2) y Vol. 3(1-2) en Colombia. Durante dos años se dejó de publicar, estableciéndose luego colaboración entre el Editor Miguel L. Pulido (1970-1973) en EUA y E.R. French (impresión) en Lima, desde donde se realizó la distribución de los Vols. 4, 5-6 y 7. Siguió luego en Lima una sucesión de equipos responsables de la edición y publicación de la revista. Como Editores, Julia Guzmán (1974-1979) y Carlos Martin (1980-1985); en 1986 C. Martin pasó a ser Director con Teresa Ames de Icochea como Editora. En 1988, ésta última tomó la responsabilidad total como Directora-Editora hasta el año 2000, cuando pasó a ser Directora con la colaboración de Enrique Fernández-Northcote como Editor. El manejo administrativo y económico de la ALF y de su revista lo realiza el Secretario Ejecutivo, cargo en el cual han estado sucesivamente: Ricardo Scheffer (1971-1974), Fernando Morales (1975-1979), E. French (1980-1987), E. Fernandez-Northcote (1988-1991) y E. French desde 1992 al presente. Durante el período 1974-1993 se publicaron con regularidad dos números por año y entre 1994 y 1997 se publicaron tres números por año (Vols. 29 a 32). Desde 1998 se publican anualmente cuatro números, atendiendo así al creciente número de manuscritos sometidos y a las recopilaciones de “abstracts” presentados en congresos organizados por la ALF y por organizaciones nacionales.

Variation in pathogens and its relationship to breeding for resistance. F. GAMBA FUICA. Departamento de Protección Vegetal, Facultad de Agronomía, Universidad de la República Oriental del Uruguay. Publication no. P-2002-0044-CRA.

The use of genetic resistance is almost the perfect method for controlling a certain disease that occurs often. It is a health-safe alternative and an economically important trait. However, its effectiveness is subject to some significant biological constraints. Pathogenic variation in response to different control strategies is one of them. All pathogens are variable with respect to host resistance but there are significant differences among them. At one extreme, highly developed specificity is observed for pathogens that are biotropic. Ultimately, the way these populations change will provide a clear indication of the degree of the host-pathogen interactions. The trend to increasing complexity in pathogen population is likely to continue in the future mainly due to the use of more genes for host resistance. Diversity within different pathogen populations will be discussed by reference to some important fungal diseases of cereal crops in Uruguay. Different virulences were identified by using infection phenotypes of Pyernophora teres and Cochliobolus sativus. The great significance of genetic resistance justifies that breeeding for resistance be given top priority worlwide. A detailed understanding of the virulence structure of the pathogenic population should be useful in the development of focused strategies to produce cultivars with more effective and long-lasting resistance.

Antagonismo de Trichoderma spp frente a Rhizoctonia solani y Botrytis cinerea, con relación a la expresión del gen prb1. P. Garcia (1), P. Leal (1), M. CUBA (2), G. Bastías (1), A. Gutiérrez (1), y M. Gidekel (1). (1) Instituto de Agroindustria, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile; (2) Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas. La Habana, Cuba. mgidekel@ufro.cl. Publication no. P-2002-0045-CRA.

Trichoderma spp es un micoparasito utilizado en el control biológico de una amplia variedad de hongos fitopatógenos. Entre otros mecanismos, Trichoderma produce una serie de antibióticos y enzimas hidrolíticas, las cuales juegan un papel importante en el micoparasitismo. Una de ellas es la proteinasa básica, la cual está directamente involucrada en este proceso. En el presente estudio se evalúa la expresión del gen prb1, codificante de ésta proteinasa, para ello se realizaron interacciones in vitro de cepas nativas de Trichoderma spp frente a los fitopatógeno R. solani y B. cinerea. El RNA del área de interacción fue purificado e hibridado con un fragmento de la región codificante del gen, empleandose como control la expresión de éste en cultivos sin confrontar. El análisis de tipo Northern blot muestra que de 10 cepas de Trichoderma spp, sólo 5 muestran un aumento en la inducción del gen en presencia del patógeno. Una de ellas fue confrontada con 5 aislados de B. cinerea, encontrándose que solo tres fueron capaces de inducir la expresión del gen. Esto indicaría que diferentes cepas de Trichoderma responden diferencialmente frente a un mismo patógeno (R. solani) y su respuesta es específica del huésped a parasitar. El presente trabajo fue financiado por el proyecto MECE SUP FRO 98-02 - Ministerio de Educación, Chile

Saneamiento al virus S de la papa (Solanum tuberosum L). Leyanis García, Zoe Sarría, Tatiana Pichardo, y Blanca Pérez. Instituto de Biotecnología de la Plantas. Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas. Carretera a Camajuaní Km 5,5 Santa Clara, Cuba. E-mail: legracia@uclv.etecsa.cu. Publication no. P-2002-0046-CRA.

El virus S de la papa es un carlavirus que se transmite por áfidos y produce como sintomatología el broceado de las hojas. La técnica de cultivo de meristemos fue utilizada para escapar de la presencia de este fitopatógeno presente en vitroplantas de papa. Para ello, se estudiaron tres rangos de tamaños de meristemos (0.3 a 0.2 mm, 0.2 a 0.1 mm, 0.1 a 0.06 mm) en medios de cultivo que contenían las sales de Murashige y Skoog (1962), 1 mg.l-1 de tiamina, 100 mg.l-1 de myoinositol, 1 mg.l-1 de ácido giberelico y 1.8 mg.l-1 de gelificante (Gellan gum Spectrum®). Las plantas regeneradas a partir de los meristemos y después de tres subcultivos fueron diagnósticadas por ELISA, obteniendo un 96.6% de sanidad cuando se utilizó el rango de 0.1 a 0.06 mm. Mientras que los porcentajes de regeneración disminuyeron en la medida que el rango de tamaño fue menor.

Virus-resistant transgenic papayas: why bother? C. V. GONSALVES (1), D. R. Lee (2), D. Gonsalves (1). (1) Dept Plant Pathology, Cornell University, Geneva, NY 14456; (2) Dept. Applied Economics and Management, Cornell University, Ithaca, NY 14853. Publication no. P-2002-0047-CRA.

In 1998, seeds of two transgenic papaya varieties, ‘Rainbow,’ and ‘SunUp’ were made freely available to Hawaii papaya farmers for commercial production and sales in the United States. This marked the first time ever that resistance to papaya ringspot virus was successfully obtained in commercial papaya cultivars. Farmers in the Puna area of Hawaii had been growing 96% of Hawaii’s papaya in 1992 when their fields were invaded by papaya ringspot virus. Five years later, all of the fields in this area were infected. Fruit production decreased dramatically. Transgenic varieties offered a chance to grow healthy, productive plants once more. But would the farmers want to grow the transgenics? And would the transgenics perform well for the farmers? In this study, 93 farmers were interviewed just over a year following seed distribution. Overall, the findings showed a phenomenal adoption rate by farmers deciding to plant transgenic varieties. The results of this study will be discussed in light of the current GMO controversy, and the potential of transgenic papaya to control the virus worldwide.

Detección del viroide del tubérculo ahusado de la papa (PSTVd) utilizando la reacción en cadena de la polimerasa por transcripción inversa mediante taqman tiempo real. Lien González (1,3), Esther Lilia Peralta (1), Kathy Walsh (2), Neil Boonham (2), y Ian Barker (2). (1) Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, Carretera de Tapaste, Apartado 10, San José de las Lajas, CP 32700, La Habana, Cuba; (2) Central Science Laboratory, Sand Hutton, York, YO41 1LZ, United Kingdom. (3) Autor para la correspondencia, correo electrónico: lien@id.censa.edu.cu. Publication no. P-2002-0048-CRA.

El viroide del tubérculo ahusado de la papa (PSTVd) es causante de notables pérdidas en el cultivo de la papa en varias regiones del mundo y está incluido en las listas de cuarentena de aquellos países donde se comercializa el tubérculo, entre ellos Cuba. La única forma segura de controlar la enfermedad causada por el PSTVd hasta el momento, está basada en procedimientos sensibles de diagnóstico seguidos por la erradicación del material infectado. En este trabajo se evaluó la Reacción en Cadena de la Polimerasa por Transcripción Inversa (RT-PCR) mediante Taqman tiempo real para el diagnóstico del PSTVd y el empleo de controles positivos y negativos. La sonda utilizada específica para PSTVd, que estuvo marcada en la posición 5’-terminal con el reportero 6-carboxifluoresceína y en la posición 3’-terminal con el apagador tetra-metilcarboxirodamina (Roche Molecular Systems, Inc.), fue específicamente degradada durante la amplificación, resultando en el incremento relativo del reportero fluorescente. Se optimizó el ensayo para lo cual se evaluó la preparación de las muestras sobre los resultados de la Taqman y se determinó la eficacia, sensibilidad, especificidad y repetibilidad relativa, y el límite de detección. Se demostró que fue determinante la calidad y limpieza de las preparaciones de ácidos nucleicos para la amplificación del ADN. El método permite la detección del PSTVd en muestras diluidas hasta 1:1,000,000, con un nivel de confianza del 99%. Los indicadores de validación determinados fueron superiores al 96%, lo que muestra la alta eficacia de esta técnica para la detección de este patógeno con niveles muy confiables estadísticamente.

Biocontrol de Capnodium sp. y Coccus viridis en el cultivo del cafeto (Coffea sp.) mediante la aplicación del rizobac, biopreparado de origen bacteriano. María Esther González, Annia Hernández, y Miruldys Valcárcel. INSTITUTO NACIONAL DE CIENCIAS AGRÍCOLAS. Gaveta Postal No. 1, San José de las Lajas, La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0049-CRA.

En la actualidad muchos microorganismos muestran acción selectiva contra un gran número de plagas y enfermedades, a través de una variada actividad biológica, de aquí la importancia de la biotecnología como fuente potencial de nuevos bioproductos con efecto fungicida e insecticida. Por tal motivo, el presente trabajo se realizó con el objetivo de evaluar la influencia del RIZOBAC, biopreparado de origen bacteriano, contra el desarrollo de Capnodium sp. y Coccus viridis, durante las primeras etapas de crecimiento y desarrollo de plántulas de cafeto. Para ello se realizaron aspersiones foliares a fin de evaluar diferentes dosis y momentos de aplicación del biopreparado. Tanto en las plantas tratadas como en los controles se analizaron parámetros morfológicos y fisiológicos, valores que mostraron un mejor comportamiento en las plantas tratadas. Con los resultados obtenidos se demostró la fuerte actividad de este producto, lográndose controlar los elevados índices de afectación causados por los patógenos en estudio, además de estimular el crecimiento vegetal en el cultivo. Se observó el mayor efecto al emplear la dosis fraccionada al 20% para todos los momentos de aplicación evaluados.

Virus y fitoplasmas en el cultivo del maiz (Zea mays, L) en Cuba: caracterizacion, distribucion y elementos para el control. GLORIA GONZÁLEZ ARIAS, Erick Miranda, Julián Fernández, Surey Valdés, Idilio Quiala, Martha Ruíz, Yhosvanni Pérez, Ma. del Loreto Rey, Javier Sampedro, Manuel Neyra, Sara Sánchez, y Neyda Arencibia. Laboratorio de Virología, Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, Calle 110 #514, Código Postal 11600, Ciudad de la Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0050-CRA.

El cultivo del maíz tiene importancia, debido a sus propiedades alimenticias para la población y como fuente nutritiva en pastos y forrajes para el ganado. En plantaciones de maíz en varias provincias se han observado plantas con síntomas similares a los ocasionados por virus y fitoplasmas, asociados a los saltahojas Peregrinus maidis y Dalbulus maidis. Para la distribución y caracterización de estas patologías, se realizaron muestreos provinciales, pruebas biológicas, vectoriales y ensayos de control con biopreparados contra Peregrinus maidis Ashms. Los resultados obtenidos demostraron la presencia del virus del mosaico del maíz (MMV) y el fitoplasma enanismo arbustivo del maíz (MBSD), los que están distribuidos en algunas provincias occidentales y orientales, se trasmiten por el fulgórido Peregrinus maidis y Dalbulus maidis. Al microscopio electrónico se observaron partículas de rhabdovirus de 225x90nm y cuerpos pleomórficos característicos del fitoplasma, y al óptico, inclusiones virales rodeando al núcleo y coloreados con la tinción de Dienes respectivamente. Los tratamientos con Beauveria bassiana y Verticilliun lecanii, en condiciones controladas manifestaron una efectividad técnica de 100 y 95% respectivamente, lo que fue corroborado en condiciones de campo, sin daño para los enemigos naturales Cycloneda sanguinea L y Crysopa cubana Hagen.

Phylogenetics of host specialization within Ceratocystis fimbriata. T. C. HARRINGTON (1), C. J. Baker (1), and A. C. Alfenas (2). (1) Dept. Plant Pathology, Iowa State University, Ames, IA 50011; (2) Dept. Fitopatologia, Universidade Federal de Vicosa, Minas Gerais, Brazil. Publication no. P-2002-0051-CRA.

Partial sequences of rDNA and a mating type idiomorph (MAT-2) have shown a surprising amount of genetic variation among more than 120 isolates of the wilt pathogen Ceratocystis fimbriata. Phylogenetic analyses suggest three major geographic clades, each comprised of host-specialized lineages. The Asian clade (AC) includes a Ficus lineage and a Colocasia lineage. The North American clade (NAC) includes four lineages: on Prunus, Quercus, Populus and Carya. The Latin American clade (LAC) is less genetically diverse but more complex than AC or NAC. Some LAC lineages are geographically localized and others more widely distributed. Host lineages within LAC include those from Ipomoea, Platanus, Xanthosoma/Syngonium, Theobroma, Eucalyptus, Mangifera, Coffea (Costa Rica), and Coffea/Citrus (Colombia). Inoculation studies have supported the hypothesis that these lineages are host-specialized. Many of these lineages appear to be locally adapted populations that have recently speciated and then were spread by humans to other regions or continents.

Estudios preliminares del "Falso Mal de Panamá" en la platanera. Julio Hernández y S. SABADELL. Departamento de Protección Vegetal. Instituto Canario de Investigaciones Agrarias. La Laguna Tenerife, Islas Canarias, Apdo. Aéreo 60, 38200, España. E mail: jhernand@icia.icia.rcanaria.es. Publication no. P-2002-0052-CRA.

El mal de Panamá, cuyo agente causal es Fusarium oxysporum f. sp. cubense (FOC), es la enfermedad más importante de la platanera en las Islas Canarias. En los últimos años, la incidencia de esta enfermedad puede haber estado sobrestimada debido a la aparición de un des­orden con sintomatología similar que fue denominado en América Central "mata amarilla" y más recientemente en Sudáfrica "Falso Mal de Panamá", al que se le ha atribuido un origen abiótico aunque nunca ha sido descartada la implicación de un agente biótico. El objetivo de esta comunicación es presentar los resultados preliminares de un estudio encaminado a determi­nar la etiología y la epidemiología del "Falso Mal de Panamá", así como establecer un diagnos­tico diferencial de ambas sintomatologías. Para determinar la presencia de posibles agentes bióticos se han estudiado muestras de rizoma y de vasos de plantas sintomáticas tomadas en fincas de la Isla de Tenerife así como del resto de las islas productoras enviadas por agricultores o Agentes de Extensión Agraria. Las muestras fueron sembradas en medios específicos para aislamientos de especies fúngicas y bacterianas. Como complemento, y para determinar la influencia de los factores bióticos y abióti­cos en la expresión de síntomas, suelos de varias fincas afectadas de las zonas norte y sur de Tenerife, fueron esterilizados o no al autoclave, realizándose un ensayo en condiciones contro­ladas de invernadero durante tres meses usando plántulas de platanera del cv. 'Gran Enana' uti­lizadas como "plantas trampa". Finalmente, con una selección de asilados fúngicos y bacterianos obtenidos a partir de las muestras estudiadas se han realizado pruebas de patogeni­cidad. Las especies fúngicas y bacterianas aisladas se corresponden en su mayoría con las des­critas como especies saprofitas o como patógenos de debilidad. Los resultados obtenidos en el ensayo de determinación de efectos bióticos o abióticos muestran que las variables de creci­miento fueron mayores en los suelos esterilizados que en los no esterilizados. En plantas creci­das en suelos no esterilizados se observaron síntomas aéreos y del interior del rizoma similares a los asociados al "Falso Mal de Panamá". Los resultados de las pruebas de patogenicidad están pendientes. Estos resultados preliminares sugieren que el "Falso Mal de Panamá"' esta causado por una interacción de agentes bióticos y de factores abióticos.

Alternativa al saneamiento a virus y bacterias en cultivos micropropagados en Cuba. Ricardo Hernández, Efraín González, Esther L. Peralta (1), Digna Bermúdez, Yilián González, Francisco Bernal (2), Xiomara Rojas, Gustavo González, Carlos Cortes, Adela Pairol, y Yanet Igarza (3). Instituto de Investigaciones en Viandas Tropicales. INIVIT. (inivit@ip.etecsa.cu); (1) Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA); (2) Facult. de Agronomía de la Univ. de Guadalajara. México; (3) Lab. Prov Biotec. Holguín. Publication no. P-2002-0053-CRA.

Cuba, con un potencial productivo de más de 60 millones de vitroplantas en las biofábricas, requiere de métodos de saneamiento que garanticen el reto productivo de lograr la cantidad de líneas sanas que demandan los programas nacionales de biotecnología. Por tal motivo se introdujo el uso de la ELECTROTERAPIA y se construyó un equipo para garantizar su utilización en diferentes especies vegetales y biofábricas (Patente. 37/95 A0 1C/08 Res. 1524/97). El procedimiento desarrollado ha sido utilizado para la obtención de microbulbillos de ajo (Allium sativum L) sanos a partir clones infectados por el complejo viral del ajo, logrando un 53-100% de plantas sanas; para la limpieza de caña de azúcar (Saccharum sp híbrido) infectada por diferentes patógenos [Badnavirus baciliforme (SCBV), mosaico (SCMV), raquitismo de los retoños (Leifsonia xyli subps xyli, Xanthomonas albilineans y X. campestris pv. vasculorum] con un 73-100% de saneamiento; para la eliminación del Virus del Enrollamiento de la Hoja (PLRV) a partir de brotes de tubérculos y más recientemente para garantizar la calidad fitosanitaria de diferentes aráceas ornamentales y de interés agrícola como Xanthosoma sp y Colocasia esculenta L., en las cuales se ha logrado la obtención de líneas libres de mosaico (DMV), lográndose muy buena aceptación sobre todo en los casos de clones recalcitrantes, en los que se alcanza entre 40 - 60% de saneamiento y más de 26% de eficiencia. El procedimiento desarrollado facilita el tratamiento de un mayor número de muestras por unidad de tiempo y mayor humanización del trabajo.

Clones mejorados de banano: comportamiento en campo frente Al Mal de Panamá de material de plantación obtenido por multiplicación en cama caliente a partir de material in vitro. J. M. HERNÁNDEZ y S. Sabadell. Departamento de Protección Vegetal. Instituto Canario de Investigaciones Agrarias. La Laguna Tenerife, Islas Canarias, Apdo. Aéreo 60, 38200, España. E mail: jhernand@icia.icia.rcanaria.es. Publication no. P-2002-0054-CRA.

El Mal de Panamá es una de las enfermedades más graves de la platanera producida por Fusarium oxysporum f. sp. cubense (FOC). Para el patosistema platanera-FOC se han descrito cuatro razas: 1, 2, 4 subtropical y 4 tropical. En Canarias está presente la raza 4 subtropical. La obtención de variedades resistentes o tolerantes sigue siendo una de las estrategias de lucha más aceptadas. Por ello, el INIBAP (International Network for the Improvement of Banana and Plan­tain) ha puesto en marcha un programa internacional de valoración de distintos materiales obte­nidos en los diferentes centros de mejora. En un primer ensayo en el que se evaluaron veintidós genotipos distintos incluyendo clones mejorados y variedades silvestres, se seleccionaron nueve (504, 506, 1261, 1262, 1264, 1265, 1271, 1282) por su respuesta a la enfermedad y por su posible interés agronómico para las condiciones de Canarias. Con la finalidad de comprobar si los resultados se repetían en un segundo ciclo en el que se emplearon plantas obtenidas en cama caliente en lugar de plantas in vitro, se diseñó un ensayo de campo en el que se incluyeron esos nueve clones, además de un referente de susceptibilidad (Gran Enana, AAA) y un referente de resistencia (cv. 'Rose", AA) que se dispusieron en campo natural y homogéneamente infestado con FOC, según un diseño total­mente al azar. Durante el ensayo se han tomado datos de las principales variables fenológicas así como de la incidencia y severidad de síntomas. Los resultados obtenidos hasta el momento indican, que los clones se han comportado de manera similar a lo ocurrido en el primer ensayo. El clon 1261 de EMBRAPA ha presentado los valores más bajos de incidencia y severidad de síntomas externos, seguido del clon 1264. El clon 1261 podría tener cierto interés agronómico aunque es un poco mas alto que los cv. Caven­dish. En general, el ciclo ha sido mas corto para todos los clones. Estos resultados no son defi­nitivos, pues la valoración final de los clones sólo podrá hacerse cuando acabe la recolección y se valoren los daños en el interior del rizoma.

CENSA: oportunidades de colaboración internacional. SILVIA HERNÁNDEZ, Elsa Martínez, y Maricela Díaz. Grupo de Colaboración Internacional, Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, Apartado 10, San José de las Lajas, La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0055-CRA.

El Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA) tiene como misión “Contribuir a preservar y elevar la salud animal, vegetal y humana”. Desde 1981 cuenta con una Dirección de Protección de Plantas que tiene dentro de sus líneas fundamentales de investigación el desarrollo de técnicas de avanzada para la vigilancia epidemiológica y la caracterización integral de plagas y enfermedades vegetales, así como el manejo integrado de plagas y enfermedades de los principales cultivos agrícolas. Debido a la experiencia acumulada por sus investigadores y la voluntad de intercambiar conocimientos con otras instituciones de diferentes países, el CENSA desarrolla un activo trabajo de Colaboración Internacional que le permite la realización de proyectos conjuntos de investigación, intercambios académicos y formación de recursos humanos. En este trabajo se ofrecen diferentes modalidades de colaboración con el CENSA y las convocatorias con 15 países, incluyendo los formularios de diferentes agencias y organismos internacionales que facilitan esta actividad.

Detecclón y diferenciación de Tilletia indica usando la Reacclón en Cadena de la Polimerasa (PCR). M. R. HERNÁNDEZ -HERNÁNDEZ, J. Aguilar-Rios, J. E. López-N., S. Romero-Cova (1), G. A. Frías-Treviño, C. A. Zapote-Martínez, and J. P. Martínez-Soriano. Centro Nacional de Referencia de Diagnóstico Fitosanitario, (DGSV-SAGARPA), Guillermo Pérez Valenzuela, No. 127, Col. Del Carmen Coyoacán, 04100, México, D. F. (1) Universidad Autónoma Chapingo. Carr. México-Texcoco, K.m. 38.5, 56230. Chapingo, Edo., México. Publication no. P-2002-0056-CRA.

Tilletia indica Mitra, es el patógeno que causa el carbón parcial del trigo (Triticum aestivum L ). Por muchos años, el trigo ha sido el cereal al que se le dedica la mayor superficie de siembra a nivel mundial; en México, es uno de los cereales más importantes después del maíz. El diagnóstico de carbones en el Centro Nacional de Referencia de Diagnóstico Fitosanitario, se realiza por técnicas morfométricas de teliosporas; sin embargo, cuando se trata de realizar el diagnóstico de una enfermedad en donde el patógeno es morfológicamente similar a otras especies del mismo género su identificación resulta laboriosa. En años recientes, se han desarrollado diversas técnicas basadas en la comparación de los ácidos nucleicos; estas técnicas incluyen marcadores moleculares, análisis de secuencias de ADN (secuenciación) y la Reacción en Cadena de la Polimersa (PCR). Esta última utiliza ADN, permitiendo mayor confiabilidad que las técnicas de diagnóstico tradicionales. El objetivo del presente trabajo fue estandarizar la PCR para la detección de este patógeno. Se evaluaron cuatro métodos de extracción de ADN, de diferentes tejidos (micelio, teliosporas y grano con diferentes grados de infección). Para la PCR, se probaron diferentes parámetros de reacción (MgCl(2), Taq polimerasa GIBCO, BRL), oligonucleótidos, ADN y temperaturas de anillamiento), se utilizaron un par de oligonucleótidos específicos para T. indica (TI17M1 5’-TCCCCTTGGATCAGAACGTA-3’ y TI17M2 5’-AGAAGTCTAACTCCCCCCTCT-3’) derivados de la clona pTIMD17. La especificidad de estos, fue evaluada con T. tritici y T. barclayana. El método más eficiente fue el CTAB, para los tejidos probados y para teliosporas de las otras especies. Con estos oligonucleótidos se obtuvo un fragmento esperado de 825 pb en T. indica. Estos resultados demuestran la aplicación de la técnica como una herramienta adicional y confiable en el diagnóstico de T. indica.

Forecasting long-distance movement of cucurbit downy mildew: a 3-year summary. G. J. HOLMES, C. E. Main, and Z. T. Keever. Department of Plant Pathology, North Carolina State University, Box 7616, Raleigh, NC 27695, U.S.A. Publication no. P-2002-0057-CRA.

Downy mildew, caused by Pseudoperonospora cubensis, is an important disease of cucurbits that occurs worldwide. The pathogen is not believed to overwinter in areas where significant winter freezes occur. Inoculum must be introduced annually from southern latitudes where it can survive year around. We are testing a disease forecasting system that tracks long-distance spore movement of P. cubensis from known sources of inoculum to other potential sites of infection. Spore transport in the atmosphere is calculated using the HY-SPLIT trajectory model from the National Oceanic and Atmospheric Administration’s Air Resources Laboratory. Outbreaks of cucurbit downy mildew have been tracked between March and October in 1998, 1999 and 2000 (over 600 forecasts). Outbreaks begin in southern Florida and move northward as the season progresses, reaching as far as the state of New York in some seasons. In Sep and Oct, frosts begin in the north and move southward, terminating the cucurbit growing season. However, in southern Florida the disease remains active year around and northward movement occurs as airborne inoculum is carried by winds and susceptible hosts are present. Forecasts have provided a reasonable estimate of the location and timing of the northward advancement of the disease. Timely reporting of disease outbreaks in all areas has been a limiting factor in the system.

Study on the post-harvest fruit rot of banana and its control. Omar Ibn-I-Hassan (1) and M. Bahadur Meah (2). (1) Ph.D. Fellow Department of Plant Pathology, BAU, Mymensingh; (2) Professor, Department of Plant Pathology, BAU, Mymensingh. Publication no. P-2002-0058-CRA.

Post-harvest fruit injuries and rots in banana of three varieties Amritasagar, Sabri and Chinichampa were recorded in 34 locations of 12 districts of Bangladesh during July’ 99 to February 2000. Forty whole sellers, 100 retailer’s shops and 10 roadside banana accumulations were inspected. A total of 3 070 636 bunches consisting of 310 832 887 fingers were inspected. Post- Harvest Fruit injuries and rots accounted for 9.4 and 3.22% respectively. Fruit injuries ranged 9.0 - 10.0% in three varieties with higher in Chinichampa. Fruit injuries were categorized as cracks and blemishes, which were estimate as 25% each. Fifty percent of fruit injuries consisted of insect bite. Post-harvest fruit rots ranged 0,06 - 9,0%, which were recorded in Sabri bananas. Other two varieties had not fruit rots. Fruit rots were categorized as stem-end rot, fruit rot, distal end rot, anthracnose and crown rot. Anthracnose accounted for 50% rots followed by fruit rot (25.0%), stem-end rot (18.05) and distal-end rot (12.0%). Botryodiplodia theobromae was consistently insolated from stem -end rot, fruit rot, and distal end rot while anthracnose-fruit yielded Colletotrichum gloeosporioides (Colletotrichum musae). Fusarium roseum B. theobromae and C. gloeosporioides were isolated from banana crown rots. Both fruit injuries and rots were higher during hot and humid weather (July - October), which decline with fall. Temperature (35 - 38°C), % R(^H) (100) in the ripening room and no or bad aeration in transport, were the main causes of fruit rots while faulty/harvesting procedure (no removal of latex), unscientific during loading and unloading in transport caused fruit injuries. Market loss in banana owing to fruit injuries and rots was estimated as Tk 3.54 crores ($6.33 Approx.) (2.2%), in the surveyed areas in 8 months.

Comparación de métodos para la detección del raquitismo de los retoños de la caña de azúcar (Leifsonia xyli subsp. xyli). ALEIKA IGLESIA (1), Esther Lilia Peralta (1), Maricela Díaz (1), J. Pérez Milián (2), Dayamí Martín (3), Victoria Pazos (4). (1) CENSA, La Habana, Cuba; (2) EPICA Matanzas, Cuba; (3) LABOR I, Habana, Cuba; (4) Universidad de la La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0059-CRA.

El diagnóstico del RSD (Leifsonia xyli subsp. xyli) se dificulta por la poca especificidad de sus síntomas y las bajas concentraciones de la bacteria en la planta. Sin embargo, resulta necesario disponer de métodos con características analíticas aceptables, que puedan ser empleados en los diferentes niveles de la red nacional de diagnóstico del país. El objetivo de este trabajo ha sido comparar distintas técnicas inmunoquímicas y moleculares y establecer adicionalmente la factibilidad del uso del método de tinción por transpiración (STM). Se corroboró la elevada eficacia de la detección mediante la inmunofluorescencia indirecta (IFI), cuyos parámetros analíticos se estimaron por encima del 95%. La coincidencia de la técnica dot-blot con la IFI fue superior al 90%. Al emplear el método STM se determinó que el porcentaje de vasos funcionales difirió significativamente (P < 0.05) entre plantas infectadas y sanas, y entre plantas infectadas antes y después del tratamiento hidrotérmico. Por otra parte se validaron las metodologías de PCR utilizando iniciadores específicos y la utilización de los aplicadores de algodón para el diagnóstico múltiple de escaldadura foliar y RSD. Ña eficacia de la detección fue superior al 90% en todas las variantes evaluadas. Es de señalar el interés práctico de este resultado, que contribuye a reducir el tiempo y el costo del diagnóstico de las dos enfermedades bacterianas más importantes del cultivo en la actualidad.

Uso de dos potenciales micoherbicidas para el control de Syngonium podophyllum Schott y Spathodea campanulata beaur en el agosistema del cafetal. LIDCAY HERRERA ISLA. Horacio Grillo Ravelo Dpto. de agronomía, Universidad Central de las Villas, Carretetera Camajuani K 5, Santa Clara, Villa Clara, Cuba. Publication no. P-2002-0060-CRA.

El empleo de los hongos fitopatógenos Ceratocystis sp. Para el combate de S. capanulata y de Cercospora spp y Colletotrichum spp para el combate de S. podophyllum Schott en el agrosistema del cafetal, abre posibilidades potenciales como micoherbicida de estas especies. Ceratosystes sp causa traqueomiccosis en S.campanulata provocando marchites y muerte de esta, sin embargos Cercospora sp y Collectrotichum sp provocan necrosis foliar que incluye un fuerte atizonamiento de la hoja en S. podophyllum. Ensayos preliminares realizados en cafetales de la zona de Topes de Collante en la región montañosa del Escambray, han producidos resultados prometedores para el control de ambas especies de actual y futuros peligros para el agrosistema del cafetal y los bosques naturales de esa región. Se exponen sintomatología, métodos de inoculación, epifitología y cuadros de daños del empleo de estos potenciales micoherbicidas. Se discute la factibilidad de su empleo en condiciones de la producción.

IACR-RES and CENSA: five years of highly productive collaboration. Stephen James (1), Elsa Martínez (2). (1) International Relations, Rothamsted Experimental Station. IACR. Harpenden, Hertfordshire AL5 2JQ United Kingdom & (2) International Relations, Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, Apdo. 10, San José de las Lajas, La Habana, Cuba. Publication no. P-2002-0061-CRA.

Estudios preliminares de la variabilidad fisiológica y morfológica de aislados de Mycosphaerella fijiensis del Ecuador. María Isabel Jiménez y Rodolfo H. Maribona. CIBE-ESPOL. Guayaquil, Ecuador. mjimenez@goliat.espol.edu.ec. Publication no. P-2002-0062-CRA.

En el Ecuador existen 180.000 hectáreas sembradas para la exportación de banano. El área en la cual se encuentran localizadas fluctúa entre las regiones climáticas muy seco tropical, seco tropical, sub-húmedo tropical y húmedo tropical, sumándose la variabilidad de microclimas. Estos pisos climáticos abarcan las provincias de El Guayas, Los Ríos, El Oro y Esmeraldas donde se desarrolla más del 90% del cultivo. Dentro de este gran marco climático los mayores costos de producción por unidad, es el control de Sigatoka negra. Su control mayoritariamente, se lo realiza con químicos, pero en los últimos años, se esta incrementando el número de aplicaciones por ciclo. Siendo tan severa su presencia que reduce a más del 50% la producción de fruta. El CIBE con las Universidades Flamencas ha iniciado un programa de mejora genetica para la resistencia al hongo, teniendo entre sus objetivos principales el establecer la existencia de variabilidad del patotipo de Mycosphaerella. fijiensis del Ecuador. Para su desarrollo se estan recolectando muestras de diferentes sitios de donde se obtienen cultivos monosporicos, a partir de los cuales se realizan estudios de crecimiento de los aislamientos en medio líquido, así como su producción de conidias