Figura 28. El principio de la PCR (Reacción en cadena de la polimerasa).

La mezcla de una reacción para la prueba de PCR contiene el ADN objetivo del virus a ser amplificado, dos cebadores (“primers”) y una polimerasa Taq estable al calor. El ácido nucleico del virus (en este caso, ADN de cadena doble) es desnaturalizado por calor a 95°C. Cuando la temperatura desciende a 55°C, dos cebadores cortos de cadena simple (fragmentos de ADN complementarios al ADN viral) se aparean (o unen) a las cadenas de ADN separadas por desnaturalización. Los cebadores son extendidos con la polimerasa Taq, la cual provee nuevos nucleótidos para construir nuevas cadenas de ADN a 72°C. El primer ciclo de síntesis resulta en dos copias de la secuencia de ADN objetivo. El ciclo se repite (desnaturalización, apareamiento o unión, y extensión), y el segundo ciclo de síntesis resulta en cuatro copias de la secuencia de ADN objetivo. Los billones de copias de nuevas cadenas de ADN que se producen durante los 40 ciclos de PCR se detectan usando electroforesis en gel (Cortesía V. Dolja).

ds DNA template: molde del ADN de doble cadena. Denaturation: desnaturalización. Primer annealing: Apareamiento (o unión) del cebador. Primer Extension: Extensión del cebador. Cycle: Ciclo.